Acta Haematologica Polonica, 2004, 35, 4
JOLANTA WOŹNIAK · JOANNA KOPEĆ-SZLĘZAK · ILONA SEFERYŃSKA · GRAŻYNA PAŁYNYCZKO · JOANNA JURGA
Immunofenotyp komórek białaczkowych w przełomie mieloblastycznym przewlekłej białaczki szpikowej (PBSz)
lmmunophenotype of myeloblasts in chrome myeloid leukemia (CML) blast crisis
- SłOWA KLUCZOWE:
- Przewlekła białaczka szpikowa • Przełom blastyczny • Immunofenotyp • Mieloblasty CD34+CD38-
- KEY WORDS:
- Chronic myeloid leukemia • Blast crisis • Immunophenotype • Myeloblasts CD34+CD38-
STRESZCZENIE: Wstęp i cel pracy. Mieloblasty w przełomie blastycznym PBSz wykazują immunofenotyp określany w piśmiennictwie jako "AML-like", a transformacja nowotworowa pojawia się najprawdopodobniej na poziomie komórek CD34+CD38-. Cel pracy stanowiła ocena immunofenotypu mieloblastów w przełomie blastycznym w porównaniu do mieloblastów w ostrej białaczce szpikowej M1, oraz ilościowa charakterystyka ekspresji molekuł CD34 i CD38 na komórkach CD34+CD38- i CD34+CD38+.
Materiał i metody. Materiał badawczy stanowił aspirat szpiku pobrany od 65 chorych: 31 chorych w przełomie mieloblastycznym PBSz oraz od 34 chorych z podtypem M1 ostrej białaczki szpikowej (OBS). Metodą badawczą była cytometria przepływowa; intensywność ekspresji przedstawiono jako wskaźnik RFI obliczany wg Miwa, a dla oznaczenia gęstości antygenu CD34 oraz stosowano test ilościowy ABC (Antigen Bound per Cell).
Wyniki i wnioski. Immunofenotyp mieloblastów w przełomie blastycznym PBSz różnił się od mieloblastów w ostrej białaczce szpikowej typu M1: a) wysoką zawartością subpopulacji prymitywnych komórek progenitorowych o fenotypie CD34+CD38- (średnio 22% komórek u 68% chorych z PBSz vs 8% komórek u 29% chorych na OBS MI, b) wyższą ekspresją molekuły charakterystycznej dla komórek linii mieloidalnej CD33 (średnia 68 ± 29% vs 38 ± 32% mieloblastów CD33+, p = 0,0003) i brakiem mieloblastów z ekspresją CD15, c) wyższą ekspresją molekuły adhezyjnej z grupy integryn b2 - CD11b (p = 0,0008) oraz silniejszą intensywnością ekspresji integryny b1 - CD29. Stwierdzone różnice mogą być odzwierciedleniem odmiennej patogenezy mieloblastów w przełomie blastycznym PBSz i/lub efektem leczenia fazy przewlekłej. Analiza intensywności ekspresji CD34 i CD38 może być przydatna do dokładniejszego określenia stadium dojrzałości komórek białaczkowych CD34+CD38- u danego chorego.
Materiał i metody. Materiał badawczy stanowił aspirat szpiku pobrany od 65 chorych: 31 chorych w przełomie mieloblastycznym PBSz oraz od 34 chorych z podtypem M1 ostrej białaczki szpikowej (OBS). Metodą badawczą była cytometria przepływowa; intensywność ekspresji przedstawiono jako wskaźnik RFI obliczany wg Miwa, a dla oznaczenia gęstości antygenu CD34 oraz stosowano test ilościowy ABC (Antigen Bound per Cell).
Wyniki i wnioski. Immunofenotyp mieloblastów w przełomie blastycznym PBSz różnił się od mieloblastów w ostrej białaczce szpikowej typu M1: a) wysoką zawartością subpopulacji prymitywnych komórek progenitorowych o fenotypie CD34+CD38- (średnio 22% komórek u 68% chorych z PBSz vs 8% komórek u 29% chorych na OBS MI, b) wyższą ekspresją molekuły charakterystycznej dla komórek linii mieloidalnej CD33 (średnia 68 ± 29% vs 38 ± 32% mieloblastów CD33+, p = 0,0003) i brakiem mieloblastów z ekspresją CD15, c) wyższą ekspresją molekuły adhezyjnej z grupy integryn b2 - CD11b (p = 0,0008) oraz silniejszą intensywnością ekspresji integryny b1 - CD29. Stwierdzone różnice mogą być odzwierciedleniem odmiennej patogenezy mieloblastów w przełomie blastycznym PBSz i/lub efektem leczenia fazy przewlekłej. Analiza intensywności ekspresji CD34 i CD38 może być przydatna do dokładniejszego określenia stadium dojrzałości komórek białaczkowych CD34+CD38- u danego chorego.
SUMMARY: Background and aim. The CML-BC myeloblasts immunophenotype in recent literature is defined as ,,AML-like", and cancer transformation into leukemic cells probably occurs in CD34+CD38- cells. Therefore, the aim of our observation was the assessment of myeloid marker and adhesion molecules expression and the quantitative analysis of CD34+CD38- and CD34+CD38+ leukemic cell subsets in CML patients during myeloblast crisis.
Material and methods. Bone marrow samples were analysed using flow cytometry qualitative and quantitative methods (FACS Calibur BD) in 31 CML patients during myeloblast crisis and 34 patients with M1 acute myeloid leukemia (AML) The expression and expression intensity (RFI and ABC) of analysed antigens were determined on leukemic cells.
Results and conclusions. Myeloblasts in CML-patients were characterized by significantly higher CD33 myeloid marker expression than on myeloblasts of M1 AML patients (mean 68% ± 29% vs 38% ± 32%, p = 0,0003) and practically lack of CD15 expression. Simultaneously a higher integrin b2 CD11b expression (p = 0,008) and a higher expression intensity of integrin b1 CD29 (p = 0,004) were noted. In CML-blast crisis there was also observed numerous CD34+CD38- cell subset (approximately 70% of patients). Different from M1 AML CML-BC myeloblast immunophenotype may be connected with specific CML-myeloblasts pathogenesis or may be an effect of chronic phase therapy. Quantitative analysis of CD34 and CD38 antigen expression is a useful tool for detailed determination of leukemic cells maturation stage in individual patient.
Material and methods. Bone marrow samples were analysed using flow cytometry qualitative and quantitative methods (FACS Calibur BD) in 31 CML patients during myeloblast crisis and 34 patients with M1 acute myeloid leukemia (AML) The expression and expression intensity (RFI and ABC) of analysed antigens were determined on leukemic cells.
Results and conclusions. Myeloblasts in CML-patients were characterized by significantly higher CD33 myeloid marker expression than on myeloblasts of M1 AML patients (mean 68% ± 29% vs 38% ± 32%, p = 0,0003) and practically lack of CD15 expression. Simultaneously a higher integrin b2 CD11b expression (p = 0,008) and a higher expression intensity of integrin b1 CD29 (p = 0,004) were noted. In CML-blast crisis there was also observed numerous CD34+CD38- cell subset (approximately 70% of patients). Different from M1 AML CML-BC myeloblast immunophenotype may be connected with specific CML-myeloblasts pathogenesis or may be an effect of chronic phase therapy. Quantitative analysis of CD34 and CD38 antigen expression is a useful tool for detailed determination of leukemic cells maturation stage in individual patient.
