STRESZCZENIE: W pracy opisano procedury wdrożone do pozyskiwania, preparatyki i przechowywania krwi pępowinowej dla celów klinicznych. Krew pozyskiwano do worków kolekcyjnych z 23 ml CPD-A przez wielokrotne nakłucie żyły pępowinowej, po wydaleniu łożyska. Średnio pobierano 65,4 ± 26 ml krwi. Do redukcji objętości użyto dwóch technik: sedymentacji erytrocytów w hydroksyetylowanej skrobi (HES) i separowania kożuszka leukocytarnego w automatycznym separatorze hematologicznym OptipressII. Obie metody pozwalają na zredukowanie początkowej objętości krwi do 20-30% z jednoczesnym odzys­kiem komórek krwiotwórczych 85,3 ± 14% dla OptipressII, i 87,3 ± 23% dla sedymentacji w HES. Metoda sedymentacji w HES pozwala na prawie całkowite pozbycie się erytrocytów z preparowanej próbki (98,6%). Procedura z użyciem OptipressII jest krótsza i mniej pracochłonna. Do ochrony komórek w trakcie zamrażania użyto dwumetylosulfotlenku (DMSO). Równoważne objętości komórek i 20% roztworu DMSO w 5% albuminie ludzkiej łączono i zamrażano z prędkością 1o/min. Zastosowana procedura pozwala na całkowity odzysk komórek krwiotwórczych po rozmrożeniu z zachowaniem żywotności komórek jednojądrzastych powyżej 95%.

SUMMARY: The procedures applied for collection, processing and storage of cord blood samples for clinical purposes were described. Cord blood samples were collected into collection bags with 23 ml CPD-A by multiple punctures of the cord vessels, after placenta delivery. The mean volume of cord blood sample was 65 ± 26 ml. Two methods: sedimentation of red blood cells in hydroxyethyl starch (HES) and separation of buffy coat in OptipressII automatic blood extractor were used for the sample volume reduction. Both methods allow for 20-30% cord blood sample volume reduction, and for recovery of haematopoietic cells 85,3 ± 14% (OptipressII) and 87,3 ± 23% (HES). The HES sedimentation procedure results in almost complete depletion of red blood cells, while the OptipressII separation method is faster and less labor consuming. Dimethylsulfoxide (DMSO) as a cryoprotectant was used for the freezing of cord blood cells. Equal volumes of cell suspension and 20% DMSO in 5% human albumin were mixed and frozen at a rate of 1o/min. The freezing protocol allows for 100% recovery of haemopoietic cells and the viability of mononuclear cells exceeds 95%.