Acta Haematologica Polonica, 2000, 31, 1
JADWIGA FABIJAŃSKA-MITEK
Zastosowanie nowej techniki kolumnowej, opartej na chromatografii powinowactwa, do wykrywania i identyfikacji przeciwciał skierowanych do krwinek czerwonych
Application of a new affinity column technology for red cell antibody detection and identification
- SłOWA KLUCZOWE:
- Pośredni test antyglobulinowy (PTA) • Aglutynacyjne techniki kolumnowe • Kolumnowa technika powinowactwa
- KEY WORDS:
- Indirect antiglobulin test (IAT) • Agglutination column technology • Affinity column technology
STRESZCZENIE: Do wykrywania przeciwciał czerwonokrwinkowych zastosowano technikę kolumnową opartą na powinowactwie bakteryjnych białek A i G, związanych z żelem agarozowym, do fragmentów Fc przeciwciał. Porównano nowy system ReACT (Gamma Biologicals) z probówkowym PTA LISS (low-ionie-strenght saline - roztwór NaCl o niskiej sile jonowej) i z kolumnowym PTA w żelu (DiaMed ID). Zbadano 214 surowic (świeżych i przechowywanych w stanie zamrożenia), wśród nich 80 zawierających przeciwciała do krwinek czerwonych (50 alloprzeciwciała, 19 autoprzeciwciała typu ciepłego klasy IgG, 11 zimne aglutyniny), 12 alloprzeciwciała anty-HLA i 41 białka monoklonalne w przebiegu szpiczaka plazmocytowego. Czułość testu gammaReACT okazała się podobna do czułości probówkowego PTALISS i trochę mniejsza od kolumnowego PTA. Reakcje były swoiste, nie obserwowano wyników fałszywie dodatnich w obecności zimnych aglutynin ani nieswoistych gammaglobulin o wysokim stężeniu. Test okazał się przydatny do wykrywania klinicznie istotnych alloprzeciwciał odpornościowych u biorców krwi.
SUMMARY: A recent1y introduced technology for antibody detection consists of affinity columns that contain bacterial protein A- and G-coated agarose against antibody Fc fragments. The new system ReACT (Gamma Biologicals) was compared to a conventional tube-IAT LISS (low-ionic-strength saline) and column gel-IAT (DiaMed ID). We tested 214 sera (fresh and stored frozen) among them 80 containing RBC antibodies (50 alloantibodies, 19 IgG warm-type autoantibodies, 11 cold agglutinins), 12 anti-HLA alloantibodies and 41 monoclonal protein from multiple myeloma patients. The sensitivity of the gamma ReACT was similar to the sensitivity of the tube-IA T, but a little lower than that of the column gel-IAT. The reactions were specific, we did not observe false positive results in sera with cold agglutinins or non-specific gammaglobulins of high concentrations. The test appeared to be useful for detection of clinically important alloantibodies in blood recipients.






