Acta Haematologica Polonica, 2001, 32, 2
MARIA KOZŁOWSKA-SKRZYPCZAK · JANUSZ HANSZ · ANNA CZYŻ · KRZYSZTOF SAWIŃSKI
Ocena zależności pomiędzy liczbą komórek jednojądrowych, prekursorów CD34+ oraz granulocytarnych (CFU-GM) w preparatach krwi uzyskanych z kolejnych leukaferez
Evaluation of the relationship between the number of mononuclears, CD34+ cells and granulocyte progenitors (CFU-GM) collected from peripheral blood in sequential leukaphereses
- SłOWA KLUCZOWE:
- Leukafereza • Komórki jednojądrowe • Komórki CD34+ • Prekursory granulocytarno-monocytowe
- KEY WORDS:
- Leukapheresis • Mononuclear cells • CD34 positive cells • Granulocyte-monocyte progenitors
STRESZCZENIE: Przeprowadzono ocenę zawartości komórek jednojądrowych i z obecnym antygenem CD34 oraz ukierunkowanych prekursorów układu granulocytarnego (CFU-GM; colony forming unit-granulocyte, monocyte), mniej (CFU-GM/14/) i bardziej dojrzałych (CFU-GM/7/) w materiale uzyskanym z kolejnych leukaferez. Aferezy wykonywano przy użyciu separatora komórkowego Baxter CS-3000 Plus. Badaniami objęto 31 chorych na choroby rozrostowe układu krwiotwórczego oraz 15 zdrowych dawców. U 23 chorych zakwalifikowanych do transplantacji autologicznych komórek hematopoetycznych, mobilizację prekursorów krwiotwórczych przeprowadzano podając cyklofosfamid (4 g/m2), u 4 chorych stosując chemioterapię wg ICE (idarubicyna - 24 mg/m2, cytarabina - 2,4 g/m2, etopozyd - 450 mg/m2) oraz u 2 - pośrednie dawki cytarabiny (12 g/m2) z epirubicyną (135 mg/m2). Od +5 dnia chorzy otrzymywali G-CSF (granulocyte-colony stimulating factor) w dawce 10 mg/kg masy ciała (m.c.). U 2 chorych stosowano jedynie czynnik wzrostu w dawce 10 mg/kg m.c. U 15 zdrowych dawców mobilizację komórek hematopoetycznych prowadzono wyłącznie przy użyciu G-CSF (10 mg/kg m.c.). Liczbę komórek jednojądrowych oceniano metodą komorową. Komórki CD34+ identyfikowano przy pomocy cytometru przepływowego (Ortho Diagnostic Systems). zawartość CFU-GM w badanym materiale określano na podstawie liczby kolonii wytworzonych w 7 i 14 dniu hodowli in vitro. Zebranie > 3 x 106 komórek CD34+/kg m.c. u chorych wymagało wykonania średnio 3 ± 2 (1-7) leukaferez, a u osób zdrowych 2 ± 1 (1 - 3) aferez. Analiza wyników uzyskanych w grupie chorych oraz dawców wskazuje na występowanie istotnej zależności pomiędzy liczbą komórek CD34+ a zawartością prekursorów granulocytarnych w kolejnych dniach separacji (p < 0,05). Natomiast zarówno u chorych jak i osób zdrowych nie wykazano współzależności pomiędzy liczbą komórek CD34+ oraz CFU-GM/7/ i CFU-GM/14/ a zawartością komórek jednojądrowych w preparatach uzyskiwanych z kolejnych leukaferez (p > 0,05).
SUMMARY: The number of mononuclears, CD34 positive cells, less (CFU-GM/14/) and more (CFU-GM/7/) mature granulocyte progenitors were assessed in material of sequential leukaphereses. Aphereses were performed with Baxter CS-3000 Plus cell separator. The study group consisted of 31 patients with myelo- and lymphoproliferative diseases qualified to autologous hematopoietic cells transplantation and 15 healthy donors. In 23 patients hematopoietic cell mobilization was performed with cyclophosphamide (4 g/m2), in 4 patients with ICE regimen (idarubicin 24 mg/m2, cytarabine 2,4 g/m2, etoposide 450 mg/m2), in 2 with intermediate-dose cytarabine (12 g/m2) and epirubicin (135 mg/m2). From the day +5 the patients received G-CSF (granulocyte - colony stimulating factor) in the dose 10 mg/kg. In 2 patients and in the group of healthy donors mobilization was performed only with G-CSF (10 mg/kg). The number of mononuclear cells was assessed with chamber method. CD34+ cells were estimated with flow cytometer (Ortho Diagnostic Systems). The quantity of granulocyte-monocyte progenitors in collected material was determined in 7 and 14 day culture in vitro. The yield of CD34+ cells >3 x 106 was obtained by median of 3±2 (1-7) aphereses in the patients and by 2±1 (1-3) in healthy donors. A positive correlation was found between the numbers of CD34+ cells and granulocyte progenitors in material of sequential leukaphereses, performed both in the patients and healthy donors (p < 0.05). However no correlation was found between the numbers of CD34+ cells, CFU-GM/7/ -, CFU-GM/14/ - progenitors and the mononuclears in collections from successive leukaphereses (p > 0.05).






